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流感病毒H5N1亞型核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)

對樣本中流感病毒H5N1亞型RNA進行檢測,適用于流感病毒H5N1型感染的輔助診斷及流行病學調查。

  • 產品品牌 REAGEN
  • 產品貨號 RNS92049
  • 產品規格 20T
  • 產品適用 流感病毒H5N1的檢測和判定
  • 產地來源 深圳

【產品名稱】

通用名稱:流感病毒H5N1亞型核酸檢測試劑盒(熒光PCR)

【包裝規格】

50人份/

【預期用途】

樣本中流感病毒H5N1亞型RNA進行檢測,適用于流感病毒H5N1型感染的輔助診斷及流行病學調查。

【檢驗原理】

本試劑盒采用聚合酶鏈式反應(PCR)結合Taqman技術,對禽流感病毒H5N1亞型的特異性核酸片段進行熒光PCR檢測。

【主要成分】

 

組分成分

50人份/

主要成分

規格

數量

 

 

PCR反應液

 

 

884μL /

 

1

引物、探針、脫氧核糖核苷三磷酸(dNTP)、緩沖體系

 

酶混合液

156μL /

1

Taq酶、MMLV

陽性對照

200μL /

1

含目的片段的質粒

陰性對照

500μL /

1

無核酸酶水

 【儲存條件及有效期】

試劑置于-30~-15避光保存,有效期為12個月。本產品反復凍融應不超過5。

【適用儀器】

熒光定量PCR儀:ABI 7500熒光PCR.;ABI Quantstudio5 Gentier 96RSLAN-96P全自動醫用PCR分析系統。

【樣本要求】

1. 適用樣本

咽拭子:應使用專用采樣拭子,適度拭抹咽后壁和兩側扁桃體部位;迅速將拭子放入標本采集管中,旋緊管蓋并密封,以防干燥。                                      

全血:疑似感染動物的靜脈血2mLEDTA-2Na抗凝管,8000rpm離心2min,取適量上清液于1.5mL滅菌離心管中。

2. 樣本運輸和保存

上述標本短期內可保存于-20℃,長期保存可置-70但不能超過6個月,標本運送應采用2~8℃冰袋運輸,嚴禁反復凍融

 【檢驗方法】

  1. 樣本處理

取待測樣本200ul,按照核酸提取試劑盒說明書進行核酸提取。

  2. 試劑配置(在準備區進行,與擴增區分開,冰上操作

注:試劑使用前要完全解凍,使用前渦旋混勻,10000 rpm離心5 s,確保試劑完全離心至管底,否則會出現裝量差異的現象。

若有N個待檢測樣本,則需配置N+2擴增反應(待檢樣本數N+1個陽性質控品+1個陰性質控品,按下表要求進行擴增反應液的配制,配制完成后充分震蕩混勻,10000 rpm離心5 s。按每管20μL分裝至0.2 ml PCR管中,并做好標記,擴增反應液需現配現用。


N人份(μL)

PCR反應液

N+2×17

酶混合液

N+2×3

總量

N+2×20

  3. 加樣在樣品處理區進行,冰上操作

按陰性質控品、待測樣品、陽性質控品的加樣順序,分別取5μL,加入至已分裝擴增反應液的八聯管中,反應總體系為25μL。蓋緊管蓋,短暫離心后置于熒光定量PCR儀中,并記錄樣本擺放順序。

  4. 擴增反應(在擴增區進行

選擇FAM通道檢測H5亞型,選擇HEX通道檢測N1亞型。按以下擴增程序表設置PCR擴增參數。

步驟

溫度

時間

循環數

1

逆轉錄

50

10min

1

2

預變性

95

3min

1

3

變性

95

10sec

45cycle

4

退火延伸及熒光檢測

55

30 sec

報告熒光:FAM、HEX;淬滅熒光:NONE。




企業愿景

    公司將一如既往的視誠信為最重要的文化精神;在經營決策和管理的全過程中信守“以產品質量、優質服務”為原則和“為人類健康服務”為宗旨的理念;融前沿科技、全球資源與優質人才為資本,以開拓創新、銳意進取、精益求精之精神,科學管理之導向,凝聚員工、客商之合力,同舟共濟,為實現人類的食品安全和生物醫藥業的高速發展不懈奮斗!

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